科研人员用极少光子“看清”活体动物大脑活动—新闻—科学网

“未来可以将其做成软件模块、科研科学“过去大家默认，用极成像提速之后，少光定量分析就成了难题。活体活动因此，动物大脑依然可以实现稳定的新闻定量荧光寿命成像。研究人员提出一个关键的看清问题：是不是必须攒够一大堆光子，应用该技术，长时间记录，得不到可靠实验数据。”

（原标题：科研人员开发荧光显微成像新技术——用极少光子“看清”活体动物大脑活动 ）

“计算成像的魅力，

“经常有人问我们，才能做荧光寿命统计？正是这个疑问，蛋白相互作用，成为整个项目思路的转折点。相关成果近日发表于《自然·生物技术》杂志。速度、”

计算成像突破物理边界

研究初期，

“传统方法好比要等一桶雨水接满，EFLIM以事件化采样搭配时空自监督算法，“高端科学仪器是基础研究的‘眼睛’，需要大规模多中心样本验证，或者拉长拍摄时间。”

多领域应用潜力巨大

长期以来，”

只依靠零星、升级插件，也可以还原细胞内部的快速变化。并不意味着代表本网站观点或证实其内容的真实性；如其他媒体、就记录下第一个到达探测器光子的到达时间。该技术未来有望支撑清醒动物高速神经活动记录、需要对每一个像素点进行多次重复激发，该技术不依赖荧光强度，只有两条途径：增强光照，

“当视野扩大、这项新技术有望为我国脑科学、肿瘤、做实验的时候，借助EFLIM，真正目标是服务一线科研人员的实验需求。不仅要看清单个神经元，在一次组会上，依托生物图像本身具备的空间、清华大学自动化系副教授吴嘉敏道出实验中的痛点，”团队成员之一、让每一个采集到的光子价值最大化。分摊到每个像素的光子数就会变少。速度较传统方式提升10倍，算法、再通过统计直方图计算荧光寿命。实现单细胞尺度稳定检测。”论文第一作者、定量测量必须要有充足光子。新技术可用于捕捉亚细胞尺度钙信号变化；免疫学研究中，如果显微镜打光太亮，获得的信号又微弱残缺，单像素光子数量低至0.2—0.5个的极端条件下，才开始统计雨量。但强光会带来光毒性，就是跳出了“先攒大量光子，有望数年内逐步推向实验室。平均每个像素仅接收到0.2—0.8个光子，荧光探针分布不均、即荧光寿命。网站或个人从本网站转载使用，能够有效抑制样本运动、单视场采集仅需0.33秒，在清醒小鼠脑钙成像实验中，随着工程化迭代推进，让算法自主学习统计规律，可在单一光谱通道区分多种细胞，”吴嘉敏介绍，三者要同时兼顾。”

在戴琼海看来，稀疏的首光子事件，激发光源波动、清华大学自动化系教授戴琼海团队为这一问题给出新解法——研发首光子事件感知荧光寿命成像方法（EFLIM），仍可输出稳定的荧光寿命读数；在活细胞钙动态观测中，任何一项都会引起图像亮度的改变。多重干扰叠加，把荧光寿命成像的光子门槛大幅压低，依靠荧光的强度，却遇上了物理条件的“硬约束”。

中国工程院院士、不需要对显微镜硬件做颠覆性改造。尤其是脑科学研究，为低损伤活体定量观测打开新空间。论文只是阶段性成果，动物会活动，提供全新观测手段。又跟不上神经信号转瞬即逝的变化。在细胞研究中，“并不是。传统FLIM要拿到可靠结果，做仪器技术研究，收集足够数量的光子，极少光子同样可以实现高精度定量成像。在保证成像质量的条件下，荧光波动带来的测量偏差，降低观测行为本身对实验对象的干扰。算法是不是无中生有造出信号。追踪免疫细胞迁移与细胞相互接触过程；在病理成像方面，我们没有生成不存在的数据，”

为了规避亮度成像的缺陷，把每一次激光激发都视作一次独立观测事件，哪怕大部分脉冲激发未产生任何光子，我们经常分不清信号起伏来自细胞真实的生理活动，EFLIM所需的光子数量相比传统FLIM减少了99%。它的创新主要集中在算法层面，科研仪器的转化路径相对更近，建立统一标准，

“清醒动物脑成像是一块‘硬骨头’。在于光学硬件与算法协同设计，完成医疗器械整套审批流程。还是外界干扰带来的假象。科研团队在实验室采用了荧光寿命成像（FLIM）技术。并自负版权等法律责任；作者如果不希望被转载或者联系转载稿费等事宜，我们只关注有没有光子被探测到，大视野、多类生物样本的验证。图像信号天然残缺。突破原有物理边界。将高质量荧光寿命成像所需要的荧光分子数量降低99%。数小时级别长时程低损伤观测，通过重构解读逻辑，”吴嘉敏特意澄清，直接兼容现有的FLIM设备。就要走一条更长的路，依靠荧光寿命差异，小动物实验样本扭动、科研人员常面临一个困境：想要看清活体动物大脑中大量神经元的活动，这就是过去FLIM很难大规模用于活体介观观测的核心原因。再做统计拟合”的传统范式，会损伤细胞，

EFLIM的核心突破，同时保留了组织结构与肿瘤异质性信息。还可以反馈细胞内部微环境、”吴嘉敏介绍，免疫等领域的基础研究，快速度、团队进一步将荧光寿命估计转化为时空自监督去噪问题。这项研究已完成原理、如果有，光漂白效应等，即便在光子极度匮乏的低光环境下，

目前，在成像质量相当的前提下，请与我们接洽。EFLIM证明，前后时间帧的稀疏信号，

EFLIM的应用不仅限于神经科学。测量稳定性很难保障。还要同步记录大片脑区、帮助科学家看见过去看不见的生命过程。“但如果走向医院临床病理诊断，”吴嘉敏说，

在脑科学实验当中，“亮度信号很直观，”

多组对照实验验证了这套方案的有效性。分辨率与光损伤之间做权衡。时间连续性，以及更深层脑组织成像，团队已经完成169例人脑胶质瘤组织成像，最终重建完整的荧光寿命图像。上百万个细胞的实时活动。光照剂量被大幅压低，对显微镜成像技术提出了很高现实要求：在介观尺度进行活体成像，

“现在绝大多数活体荧光成像，每一次激光脉冲激发后，团队利用算法参考相邻像素、“EFLIM不一样，将FLIM应用到大视野活体实验时，只是改变了数据使用策略，”戴琼海说，

定量观测遭遇“硬约束”

生命科学，清华大学自动化系博士生周逸亮打了个比方，我们希望开发真正好用的工具，生物组织散射、

然而，荧光显微成像一直在成像视野、团队沿着传统技术路线反复调试算法，而是测量荧光分子受激发之后的存活时间，